नमूना अधिग्रहण से लेकर नैदानिक ​​मूल्य तक एक व्यवस्थित तुलना

Aug 27, 2026

https://www.chamfondbiotech.com/4{{3}प्रकार{{4}का {{5}हड्डी{{6}मज्जा{{7}बायोप्सी-नीडल्स/


I. सूक्ष्म शारीरिक आधार और परीक्षा सिद्धांत

1.1 अस्थि मज्जा की ऊतकवैज्ञानिक संरचना

अस्थि मज्जा मानव शरीर में सबसे बड़ा और सबसे सक्रिय हेमटोपोइएटिक अंग है, जो शरीर के कुल वजन का लगभग 4% -5% है, जिसकी कुल मात्रा लगभग 2.6-4.0 किलोग्राम (70 किलोग्राम के वयस्क में) है। हिस्टोलॉजिकल दृष्टिकोण से, अस्थि मज्जा में दो मुख्य घटक होते हैं:

हेमेटोपोएटिक पैरेन्काइमल कोशिकाएं: इनमें हेमेटोपोएटिक स्टेम कोशिकाएं (एचएससी), विभिन्न वंशों की पूर्वज कोशिकाएं और विभेदन के विभिन्न चरणों में परिपक्व रक्त कोशिकाएं शामिल हैं। शारीरिक स्थितियों के तहत, हेमेटोपोएटिक स्टेम कोशिकाएं मायलॉइड (एरिथ्रोइड, ग्रैनुलोसाइटिक-मोनोसाइटिक, मेगाकार्योसाइटिक) और लिम्फोइड (टी{{3}सेल, बी-सेल, एनके{5}}सेल) मार्गों के साथ अंतर करते हुए स्वयं को नवीनीकरण बनाए रखने के लिए असममित विभाजन से गुजरती हैं।

हेमेटोपोएटिक माइक्रोएन्वायरमेंट (एचएमई): जालीदार कोशिकाओं, संवहनी एंडोथेलियल कोशिकाओं, फ़ाइब्रोब्लास्ट, एडिपोसाइट्स, बाह्य कोशिकीय मैट्रिक्स (कोलेजन फाइबर, फ़ाइब्रोनेक्टिन, लैमिनिन, आदि), और तंत्रिका अंत से बना है। यह सूक्ष्मपर्यावरण साइटोकिन्स (उदाहरण के लिए, एससीएफ, टीपीओ, जी-सीएसएफ, आईएल-3) को स्रावित करता है और एचएससी होमिंग, प्रसार और विभेदन को सूक्ष्मता से विनियमित करने के लिए भौतिक मचान प्रदान करता है।

अस्थि मज्जा गुहा के भीतर संवहनी तंत्र की विशेषता हैsinusoids​ - चौड़े एंडोथेलियल अंतराल के साथ पतली {{1}दीवारों वाली केशिकाओं का एक नेटवर्क। परिपक्व रक्त कोशिकाएं परिधीय परिसंचरण में प्रवेश करने के लिए साइनसॉइडल एंडोथेलियम को पार करती हैं। इन साइनसॉइड्स की संरचनात्मक अखंडता सीधे प्रभावित करती है कि अस्थि मज्जा पंचर के दौरान एस्पिरेटेड नमूने पतले हो जाते हैं या नहीं, और बायोप्सी नमूनों में नव संवहनीकरण और असामान्य घुसपैठ के मूल्यांकन के लिए एक महत्वपूर्ण रूपात्मक संकेतक के रूप में भी कार्य करता है।

1.2 लाल मज्जा और पीली मज्जा के बीच गतिशील रूपांतरण

मज्जा प्रकार

संघटन

वितरण

व्यावहारिक स्थिति

लाल मज्जा

हेमेटोपोएटिक कोशिकाएं ~40%-60%, एडिपोसाइट्स ~30%-50%

शैशवावस्था में सभी हड्डियों में वितरित; वयस्कों में, खोपड़ी, उरोस्थि, पसलियों, कशेरुकाओं, श्रोणि और फीमर/हुमेरी के समीपस्थ सिरों पर केंद्रित होता है

सक्रिय हेमटोपोइजिस; सभी प्रकार की परिपक्व रक्त कोशिकाओं का लगातार उत्पादन करता रहता है

पीला मज्जा

Adipocytes predominate (>70%); बहुत कम हेमेटोपोएटिक कोशिकाएँ

वयस्कों में लंबी हड्डियों के शाफ्ट (उदाहरण के लिए, डिस्टल ऊरु शाफ्ट)

शांत अवस्था, लेकिन गंभीर रक्ताल्पता, मज्जा घुसपैठ, या मज्जा परिगलन जैसी रोग स्थितियों के तहत लाल मज्जा में विपरीत रूपांतरण ("पीला{0}}से-लाल उत्क्रमण") से गुजर सकता है

नैदानिक ​​सहसंबंध: अस्थि मज्जा बायोप्सी अनुभागों पर, एचई धुंधलापन लाल मज्जा क्षेत्रों (कोशिका - सघन, गहरे दाग वाले) और पीले मज्जा क्षेत्रों (वसा रिक्तिकाएं, हल्के दाग वाले) के बीच प्रत्यक्ष दृश्य अंतर की अनुमति देता है। इस अनुपात में परिवर्तन (उदाहरण के लिए, मज्जा सेलुलर ग्रेडिंग) हेमेटोपोएटिक रिजर्व का आकलन करने के लिए प्रमुख संकेतक हैं। अस्थि मज्जा एस्पिरेशन स्मीयर यह स्थानिक जानकारी प्रदान नहीं कर सकता है।

1.3 दो परीक्षा विधियों के पीछे जैविक तर्क

अस्थि मज्जा आकांक्षा और बायोप्सी के नैदानिक ​​मूल्य में भिन्नता का कारण मौलिक रूप से भिन्न हैमज्जा के आयाम वे "देखते हैं":

अस्थि मज्जा आकांक्षा​ उपज एमुक्त कोशिकाओं का पृथक्कृत निलंबन​ - इसका लाभ उच्च -रिज़ॉल्यूशन रूपात्मक अवलोकन और व्यक्तिगत कोशिकाओं का साइटोकेमिकल धुंधलापन है; इसका नुकसान ऊतक के भीतर कोशिकाओं के मूल स्थानिक संबंध का नुकसान है ("किसके बगल में कौन है" जानकारी खो जाती है)।

अस्थि मज्जा बायोप्सी​ उपज एत्रि-आयामी ऊतक अनुभाग​ - यह कोशिकाओं और सूक्ष्म पर्यावरण ("पड़ोस प्रभाव") के बीच स्थानिक संबंध को संरक्षित करता है, लेकिन निर्धारण और अनुभागीकरण के कारण बारीक सेलुलर विवरण के कुछ नुकसान की कीमत पर।

दोनों के बीच संबंध समान है"ढीली लेगो ईंटों के ढेर को देखते हुए"​ (आकांक्षा) बनाम"पूरी तरह से इकट्ठे लेगो मॉडल को देख रहे हैं"​ (बायोप्सी) - पहला प्रत्येक ईंट के आकार और रंग के स्पष्ट निरीक्षण की अनुमति देता है; उत्तरार्द्ध समग्र संरचना और संयोजन पैटर्न को प्रकट करता है। नैदानिक ​​निदान में, दोनों में से कोई भी डिस्पेंसेबल नहीं है।


द्वितीय. ऑपरेटिंग उपकरणों में संरचनात्मक अंतर

2.1 अस्थि मज्जा आकांक्षा सुइयों के डिजाइन सिद्धांत

क्लिनिकल अभ्यास में सबसे अधिक उपयोग की जाने वाली एस्पिरेशन सुइयां हैंजमशीदी-संशोधित​ यारोश-प्रकार​ सुईयां. उनके मुख्य घटकों में शामिल हैं:

अवयव

समारोह

सुई प्रवेशनी (बाहरी सुई)

कॉर्टिकल हड्डी में प्रवेश करने के लिए बेवेल्ड या पिरामिडनुमा टिप वाली एक खोखली धातु ट्यूब; बाहरी व्यास आमतौर पर 14-16 जी (~1.6-2.1 मिमी)

स्टाइललेट (आंतरिक कोर)

प्रवेशनी के भीतरी व्यास से मेल खाती एक ठोस धातु की छड़; जब डाला जाता है, तो यह सुई की नोक के बेवल को सील कर देता है ताकि हड्डी के मलबे या ऊतक को डालने के दौरान लुमेन को अवरुद्ध होने से रोका जा सके

गहराई रोक (फिक्सेटर)

एक स्लाइडिंग रिंग जिसे प्रवेश गहराई को पूर्व निर्धारित करने के लिए प्रवेशनी के साथ लॉक किया जा सकता है, जो विपरीत कॉर्टिकल प्लेट के माध्यम से प्रवेश को रोकती है (विशेष रूप से स्टर्नल पंचर में महत्वपूर्ण)

सुई हब और कनेक्टर

आकांक्षा के दौरान सिरिंज जोड़ने के लिए प्रवेशनी की पूंछ पर टर्मिनल कनेक्शन

काम के सिद्धांत: सुई के कॉर्टेक्स में प्रवेश करने और मज्जा गुहा में प्रवेश करने के बाद, स्टाइललेट को हटा दिया जाता है और नकारात्मक दबाव उत्पन्न करने के लिए एक सूखी सिरिंज लगाई जाती है, जो मज्जा द्रव को सिरिंज में खींचती है। नकारात्मक दबाव की भयावहता और अवधि सीधे नमूने की गुणवत्ता को प्रभावित करती है - अत्यधिक नकारात्मक दबाव या लंबे समय तक आकांक्षा साइनसॉइडल रक्त के बड़े पैमाने पर प्रवाह का कारण बनती है, जिससे "पतला विरूपण" बनता है।

2.2 अस्थि मज्जा बायोप्सी सुई के डिजाइन सिद्धांत

अस्थि मज्जा बायोप्सी सुइयों को अलग-अलग डिज़ाइन दर्शन के साथ दो प्रमुख श्रेणियों में विभाजित किया गया है:

(1) ट्रेफिन/काटने की सूइयां

द्वारा प्रतिनिधित्व किया गयाजमशीदी बायोप्सी सुई​ (वर्तमान में अंतरराष्ट्रीय मानक):

अवयव

समारोह

बाहरी प्रवेशनी (ट्रोकार)

सिरे पर तेज़ धार वाली धातु की ट्यूब; बाहरी व्यास आमतौर पर 11-13 जी (~2.4-3.0 मिमी)

भीतरी स्टाइललेट

बाहरी प्रवेशनी से थोड़ी लंबी नोक वाली एक ठोस छड़; मज्जा में प्रवेश करने और ऊतक के अवरोध को रोकने के लिए पहले डाला जाता है

सँभालना

दो हाथों से घूर्णी बल लगाने के लिए T{0}आकार या धनुषाकार{{1}आकार

गहराई के निशान

दृश्य गहराई से पढ़ने के लिए प्रवेशनी की सतह पर ग्रेजुएटेड स्केल

काम के सिद्धांत: आंतरिक स्टाइललेट और बाहरी प्रवेशनी को एक पूर्व निर्धारित गहराई तक मज्जा में एक साथ घुमाया जाता है। फिर स्टाइललेट को हटा दिया जाता है, और अस्थि मज्जा ऊतक के एक छोटे बेलनाकार कोर को काटने के लिए बाहरी प्रवेशनी को आगे घुमाया जाता है, जिसे फिर प्रवेशनी के साथ वापस ले लिया जाता है।

(2) रोटरी सॉ नीडल्स (बायोप्सी पंच)

द्वारा प्रतिनिधित्व किया गयाइस्लाम बायोप्सी सुई, जो एक उच्च -स्पीड रोटरी कटिंग तंत्र का उपयोग करता है। इन सुइयों का आज क्लिनिकल अभ्यास में कम उपयोग किया जाता है और कभी-कभी विशिष्ट साइटों (उदाहरण के लिए, स्टर्नल बायोप्सी) के लिए उपयोग किया जाता है।

2.3 सुई के व्यास में अंतर का जैविक और नैदानिक ​​महत्व

तुलना

आकांक्षा सुई (14-16 ग्राम)

बायोप्सी सुई (11-13 ग्राम)

भीतरी व्यास

~1.2-1.6 मिमी

~2.0-2.8 मिमी

ऊतक आघात

न्यूनतम; पंचर साइट पर वस्तुतः किसी टांके की आवश्यकता नहीं होती है

थोड़ा अधिक, लेकिन इलियाक क्रेस्ट बायोप्सी के लिए भी टांके लगाने की आवश्यकता नहीं होती है

दर्द का स्तर

हल्का (एक तीव्र इंट्रामस्क्युलर इंजेक्शन के बराबर)

कुछ हद तक अधिक ध्यान देने योग्य, लेकिन पर्याप्त स्थानीय संज्ञाहरण के साथ सहनीय

नमूना मात्रा

0.2-0.5 मिली तरल

1.5-2.0 सेमी लंबा ऊतक कोर

बाद की प्रक्रियाओं पर प्रभाव

लगभग कोई नहीं

उसी पंचर साइट को अल्पावधि में दोबारा बायोप्सी नहीं किया जाना चाहिए (प्रक्रियाओं के बीच 4-6 सप्ताह से अधिक या उसके बराबर की अनुमति दें)

तकनीकी नोट: बायोप्सी सुई का मोटा डिज़ाइन केवल "अधिक सामग्री लेने" के बारे में नहीं है - इसका मुख्य उद्देश्य यह सुनिश्चित करना है कि ऊतक कोर का व्यास इतना बड़ा हो कि सेक्शनिंग के बाद पर्याप्त सेल संख्या और स्थानिक वास्तुकला को संरक्षित किया जा सके। यदि कोर बहुत पतला है (<1.5 mm diameter), it is highly prone to fragmentation or distortion during decalcification and sectioning, severely compromising diagnostic value.


तृतीय. नमूना अधिग्रहण और प्रसंस्करण में मौलिक अंतर

3.1 अस्थि मज्जा आकांक्षा: तरल नमूना साइटोलॉजिकल विश्लेषण का पूर्ण कार्यप्रवाह

(1) आकांक्षा के तकनीकी मुख्य बिंदु

सिरिंज चयन: A सूखी 10 मिलीलीटर सिरिंज​ अनुशंसित है. सूखापन गंभीर है - यहां तक ​​कि नमी की थोड़ी मात्रा भी जमाव कैस्केड को सक्रिय कर सकती है, जिससे मज्जा का नमूना धब्बा लगाने से पहले जम जाता है, जिसके परिणामस्वरूप एक भयावह "कोई कोशिकाएं नहीं दिखती" स्थिति पैदा होती है।

आकांक्षा मात्रा नियंत्रण: 0.2-0.5 मिली इष्टतम है. बहुत छोटी (<0.1 ml) may result in insufficient cell density on the smear; too much (>1.0 मिली) अत्यधिक साइनसॉइडल रक्त प्रवाह और परिधीय रक्त कमजोर पड़ने का कारण बनता है - स्मीयर प्रचुर मात्रा में परिपक्व लिम्फोसाइट्स और न्यूट्रोफिल दिखाएगा, जबकि ब्लास्ट प्रतिशत नीचे की ओर "पतला" होता है, जिससे आसानी से होता हैगलत नकारात्मक बातें या बीमारी के बोझ को कम आंकना.

अभीप्सा की गति: होना चाहिएधीमी और स्थिरअत्यधिक तात्कालिक नकारात्मक दबाव से बचने के लिए।

(2) मानकीकृत स्मीयर तैयारी वर्कफ़्लो

कदम

परिचालन विवरण

गुणवत्ता नियंत्रण बिंदु

आवेदन छोड़ें

एस्पिरेशन के तुरंत बाद स्टाइललेट दोबारा डालें; जल्दी से एक सिरे से ~1 सेमी पहले से लेबल वाली स्लाइड पर मज्जा द्रव की एक बूंद डालें

अभीप्सा से लेकर धब्बा तक पूर्णता भीतर होनी चाहिए30-60 सेकंड​सेल ऑटोलिसिस या क्लॉटिंग को रोकने के लिए

प्रसार

सहायक 30 डिग्री -45 डिग्री के कोण पर स्प्रेडर के रूप में एक और स्लाइड का उपयोग करता है, हल्के से ड्रॉप को छूता है और स्थिर गति से आगे बढ़ता है

स्प्रेडर की गति स्मीयर की मोटाई निर्धारित करती है: तेज़=पतला; धीमा=मोटा

स्लाइडों की संख्या

नियमित रूप से 5-8 स्मीयर तैयार करें; यदि साइटोकेमिकल दाग (पीओएक्स, पीएएस, एनएसई, आदि) की योजना बनाई गई है तो अतिरिक्त 3-5 तैयार करें

अपर्याप्त स्लाइड सबसे आम नैदानिक ​​समस्याओं में से एक हैं

सुखाने

हवा-स्वाभाविक रूप से शुष्क;कभी भी गर्म करके न सुखाएं​ (कोशिका सिकुड़न और विकृति का कारण बनता है)

सूखने के तुरंत बाद प्रसंस्करण के लिए भेजें

(3) स्टेनिंग सिस्टम

नियमित धुंधलापन: राइट-गिम्सा मिश्रित दाग परमाणु क्रोमैटिन पैटर्न, न्यूक्लियोली, साइटोप्लाज्मिक ग्रैन्यूल और रिक्तिकाएं स्पष्ट रूप से प्रदर्शित करता है।

साइटोकेमिकल धुंधलापन: इसमें तीव्र ल्यूकेमिया के एफएबी वर्गीकरण के लिए महत्वपूर्ण पेरोक्सीडेज (पीओएक्स), सूडान ब्लैक बी (एसबीबी), गैर - विशिष्ट एस्टरेज़ (एनएसई), विशिष्ट एस्टरेज़ (सीई), आवधिक एसिड {{1} शिफ (पीएएस), और एसिड फॉस्फेट (एसीपी) - शामिल हैं।

लोहे का दाग: अंतःकोशिकीय और बाह्य कोशिकीय आयरन का आकलन करने के लिए मज्जा स्मीयरों का प्रशियाई नीला धुंधलापन - आयरन की कमी वाले एनीमिया और पुरानी बीमारी के एनीमिया के निदान के लिए स्वर्ण मानक।

3.2 अस्थि मज्जा बायोप्सी: ठोस नमूना हिस्टोपैथोलॉजिकल विश्लेषण का पूर्ण कार्यप्रवाह

(1) ऊतक अधिग्रहण के तकनीकी मुख्य बिंदु

पसंदीदा साइट: पश्च सुपीरियर इलियाक रीढ़​ - पतला कॉर्टेक्स, प्रचुर मात्रा में मज्जा, सुरक्षित संचालन, और इष्टतम कोर लंबाई और गुणवत्ता।

सम्मिलन कोण: हड्डी की सतह के लंबवत, घूर्णी गति के साथ उन्नत।

अधिग्रहण की गहराई: आमतौर पर 1.5-2.0 सेमी तक आगे बढ़ें; गहरी पैठ से नैदानिक ​​जानकारी में उल्लेखनीय वृद्धि किए बिना दर्द बढ़ जाता है।

कोर पुनर्प्राप्ति: घूर्णी काटने के बाद, कोर के साथ बाहरी प्रवेशनी को धीरे-धीरे हटा दें। सुई की नोक पर ऊतक की एक छोटी सी भूरे रंग की सफेद पट्टी (लगभग तिल से लेकर चावल के दाने के आकार की) दिखाई देगी।

(2) नमूना निर्धारण में महत्वपूर्ण कदम

कदम

परिचालन विवरण

यह क्यों मायने रखती है

तत्काल निर्धारण

कोर रखेंतुरंत10% न्यूट्रल बफर्ड फॉर्मेलिन में

विलंबित निर्धारण कोशिका ऑटोलिसिस और परमाणु विखंडन का कारण बनता है, जो रूपात्मक मूल्यांकन से गंभीर रूप से समझौता करता है

निर्धारण अवधि

के लिए कमरे का तापमान4-24 घंटे​ (कोर आकार के आधार पर)

-निर्धारण के तहत → डीकैल्सीफिकेशन के दौरान ऊतक का विघटन; ओवर -फिक्सेशन → एंटीजन मास्किंग, इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री को ख़राब करना

फिक्सेटिव वॉल्यूम

फिक्सेटिव वॉल्यूम होना चाहिए10-20 बारऊतक की मात्रा

पूर्ण पैठ सुनिश्चित करता है

(3) डीकैल्सीफिकेशन और एंबेडिंग

अस्थि मज्जा बायोप्सी के लिए सबसे अनोखा और चुनौतीपूर्ण पूर्व-प्रसंस्करण चरण हैविकैल्सीकरण:

सिद्धांत: अस्थि ऊतक में प्रचुर मात्रा में हाइड्रॉक्सीपैटाइट क्रिस्टल होते हैं, जिन्हें ऊतक को टुकड़े करने योग्य अवस्था में नरम करने के लिए अम्लीय डीकैल्सीफाइंग एजेंटों (उदाहरण के लिए, ईडीटीए, फॉर्मिक एसिड -फॉर्मेल्डिहाइड मिश्रण) द्वारा भंग किया जाना चाहिए।

विधि चयन:

ईडीटीए डीकैल्सीफिकेशन​ (अनुशंसित): चेलेटिंग क्रिया सौम्य है, ऊतक एंटीजन और डीएनए को अच्छी तरह से संरक्षित करती है, डाउनस्ट्रीम आईएचसी और आणविक परीक्षण के लिए उपयुक्त है; नुकसान लंबी अवधि (3-7 दिन) है।

एसिड रैपिड डीकैल्सीफिकेशन​ (उदाहरण के लिए, नाइट्रिक एसिड विधि): तेज़ (कई घंटे) लेकिन एंटीजन और न्यूक्लिक एसिड को महत्वपूर्ण नुकसान पहुंचाता है, जो संभावित रूप से डाउनस्ट्रीम परख को प्रभावित करता है।

पैराफिन एम्बेडिंग: डीकैल्सीफिकेशन के बाद, ऊतक क्रमिक अल्कोहल निर्जलीकरण, जाइलीन समाशोधन, पैराफिन घुसपैठ और पैराफिन ब्लॉक में एम्बेडिंग से गुजरता है।

(4) सेक्शनिंग और स्टेनिंग

दाग का प्रकार

विशिष्ट विधियाँ

निदानात्मक उपयोग

नियमित दाग

वह दाग, गिमेसा दाग

सेलुलर घनत्व, वसा अनुपात, असामान्य सेल घुसपैठ पैटर्न का आकलन करें

फाइब्रोसिस मूल्यांकन

गोमोरी सिल्वर स्टेन (रेटिकुलिन), मैसन ट्राइक्रोम

अस्थि मज्जा फाइब्रोसिस ग्रेडिंग (एमएफ-0 से एमएफ-3)

इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री (आईएचसी)

सीडी34, सीडी117, एमपीओ, सीडी3, सीडी20, सीडी138, आदि।

असामान्य कोशिका वंश का निर्धारण करें, न्यूनतम अवशिष्ट रोग का आकलन करें

विशेष दाग

कांगो लाल (अमाइलॉइडोसिस), पीएएस (कवक/म्यूसिन)

विशिष्ट रोग स्थितियों की पुष्टि करें


चतुर्थ. डायग्नोस्टिक फ़ायदों की गहराई से तुलना

4.1 अस्थि मज्जा आकांक्षा के अनूठे लाभ - गहन विश्लेषण

(1) एकल-कोशिका विभेदन रूपात्मक निदान

मैरो स्मीयर की सबसे बड़ी ताकत यही हैप्रत्येक कोशिका "अलग-अलग फैली हुई" है​ - अच्छी प्रसार तकनीक के साथ, कोशिकाओं को बिना किसी ओवरलैप के एकल मोनोलेयर में व्यवस्थित किया जाता है। यह रोगविज्ञानी को तेल विसर्जन (1000×) के तहत प्रत्येक कोशिका की जांच करने में सक्षम बनाता है:

परमाणु क्रोमेटिन स्थूलता और वितरण पैटर्न

न्यूक्लियोली की संख्या, आकार और प्रमुखता

साइटोप्लाज्मिक रंग, कणिका प्रकार (एजुरोफिलिक, न्यूट्रोफिलिक, ईोसिनोफिलिक, आदि)

कोशिका का आकार और रूपात्मक नियमितता

यह"सेल-स्तर" रिज़ॉल्यूशन3-5 माइक्रोमीटर मोटे ऊतक अनुभागों में बायोप्सी अनुभागों - के साथ अप्राप्य है, नाभिक अक्सर लंबवत रूप से ओवरलैप होते हैं, साइटोप्लाज्मिक विवरण संकुचित होते हैं, और व्यक्तिगत कोशिकाओं का सटीक वर्गीकरण बेहद कठिन होता है।

(2) विस्तृत मेगाकार्योसाइट मूल्यांकन

मेगाकार्योसाइट्स मज्जा में सबसे बड़ी कोशिकाएं हैं (व्यास में 50-100 माइक्रोन तक)। कई विकारों के लिए रूपात्मक असामान्यताएं नैदानिक ​​रूप से महत्वपूर्ण हैं:

असामान्यता

रूपात्मक विशेषताएं

सम्बंधित रोग

विशाल रूप

Cell body >100 μm, excessive lobulation (>10 पालियाँ)

मेगालोब्लास्टिक एनीमिया (बी12/फोलेट की कमी)

मेगालोब्लास्टॉइड परिवर्तन

बढ़े हुए कोशिका शरीर लेकिन सीमित लोब्यूलेशन; परमाणु परिपक्वता साइटोप्लाज्म से पीछे रहती है

एमडीएस, मेगालोब्लास्टिक एनीमिया

माइक्रोमेगाकार्योसाइट्स

छोटी कोशिका काय (लिम्फोसाइटों की तुलना में), बिना खंडित या न्यूनतम खंडित नाभिक

एमडीएस (विशेष रूप से 5क्यू- सिंड्रोम), एएमएल आवर्ती आनुवंशिक असामान्यताओं के साथ

स्मीयर पर, ये असामान्यताएं आसानी से स्पष्ट हो जाती हैं; बायोप्सी अनुभागों में, मेगाकार्योसाइट्स अक्सर अन्य कोशिकाओं द्वारा अस्पष्ट हो जाते हैं और अनुभाग मोटाई सीमाओं के कारण उनकी पूर्ण आकृति विज्ञान की सराहना करना मुश्किल होता है।

(3) साइटोकेमिकल दागों का मात्रात्मक मूल्य

मज्जा स्मीयर पर साइटोकेमिकल धुंधला परिणाम हो सकते हैंसटीक मात्रा निर्धारित​ - उदाहरण के लिए, POX सकारात्मकता दर को प्रतिशत के रूप में व्यक्त किया जाता है (उदाहरण के लिए, "ब्लास्ट POX सकारात्मकता 85%), जो AML को सभी से अलग करने के लिए एक मुख्य मानदंड है। बायोप्सी अनुभागों में, एंजाइम गतिविधि और क्रोमोजेन जमाव निर्धारण और डीकैल्सीफिकेशन से प्रभावित होते हैं, जिससे सटीक संख्यात्मक मानों के बिना, केवल अर्ध-मात्रात्मक परिणाम ("कमजोर सकारात्मक" या "फोकली सकारात्मक") मिलते हैं।

4.2 अस्थि मज्जा बायोप्सी के अनूठे फायदे - गहन विश्लेषण

(1) हेमेटोपोएटिक बनाम वसायुक्त ऊतक का स्थानिक अनुपात

बायोप्सी अनुभागों में, लाल मज्जा (हेमेटोपोएटिक क्षेत्र) और पीले मज्जा (वसायुक्त क्षेत्र) का अनुपात हो सकता हैप्रत्यक्ष रूप से देखा और परिमाणित किया गया. सामान्य वयस्क मज्जा में लगभग 30%-50% हेमेटोपोएटिक ऊतक और 50%-70% वसा होता है। इस अनुपात में परिवर्तन के महत्वपूर्ण नैदानिक ​​निहितार्थ होते हैं:

पैथोलॉजिकल अवस्था

लाल/पीला मज्जा अनुपात परिवर्तन

नैदानिक ​​महत्व

अविकासी खून की कमी

लाल मज्जा काफी कम हो गया (<10%), nearly entirely replaced by fat

अप्लास्टिक एनीमिया की पुष्टि के लिए मुख्य मानदंड

मायलोइड्सप्लास्टिक सिंड्रोम

असामान्य स्थानीयकरण (एएलआईपी घटना) के साथ लाल मज्जा में वृद्धि (50%-80%)

एमडीएस निदान का समर्थन करता है

मायलोफाइब्रोसिस

लाल मज्जा का स्थान घने रेशेदार ऊतक ने ले लिया

पीएमएफ निदान के लिए आवश्यक

ल्यूकेमिक घुसपैठ

लाल मज्जा लगभग पूरी तरह से ल्यूकेमिक कोशिकाओं की एक मोनोमोर्फिक आबादी द्वारा कब्जा कर लिया गया है

ट्यूमर के बोझ का आकलन करता है

(2) न्यूक्लियेटेड सेल घनत्व का सटीक मूल्यांकन

बायोप्सी अनुभाग की गणना की अनुमति देते हैंप्रति वर्ग मिलीमीटर न्यूक्लियेटेड कोशिका गिनती​ या a का उपयोग करेंअर्ध-मात्रात्मक सेल्युलैरिटी ग्रेडिंग प्रणाली​ (5-स्तरीय):

सेल्युलैरिटी ग्रेड

न्यूक्लियेटेड कोशिका अनुपात

संगत पैथोलॉजिकल स्थिति

अत्यंत अतिकोशिकीय

>90%

सीएमएल ब्लास्ट चरण, कुछ एएमएल

स्पष्ट रूप से अतिकोशिकीय

70%–90%

सीएमएल क्रोनिक चरण, पीवी, ईटी

सेलुलर (सामान्य)

30%–70%

सामान्य या हल्का असामान्य

हाइपोसेल्यूलर

10%–30%

कुछ एमडीएस, उपचार के बाद की स्थिति बताती है

गंभीर रूप से हाइपोसेल्यूलर

<10%

गंभीर अप्लास्टिक एनीमिया

यह बायोप्सी-आधारित सेल्युलैरिटी मूल्यांकन स्मीयर मूल्यांकन की तुलना में अधिक उद्देश्यपूर्ण है।

(3) साइनसॉइडल प्रदूषण से बचाव - वास्तव में हेमेटोपोएटिक स्थिति को दर्शाता है

आकांक्षा के दौरान, नकारात्मक दबाव अनिवार्य रूप से मज्जा द्रव के साथ साइनसॉइडल रक्त खींचता है, जिससे कुछ हद तक पतलापन होता है। हालाँकि अनुभवी ऑपरेटर एस्पिरेशन वॉल्यूम को नियंत्रित करके इसे कम कर सकते हैंपूर्णतया समाप्त नहीं किया जा सकता. इसके विपरीत, बायोप्सी ऊतक कोर, साइनसॉइडल कमजोर पड़ने के अधीन नहीं हैं - साइनसॉइडल रक्त निर्धारण के दौरान धोया जाता है, और अनुभाग पर देखी जाने वाली कोशिकाएं विशेष रूप से पैरेन्काइमल मज्जा कोशिकाएं होती हैं। मूल्यांकन करते समय यह विशेष रूप से महत्वपूर्ण हैहाइपोसेल्यूलर एमडीएस​ याप्रारंभिक मायलोफाइब्रोसिस.

(4) विशिष्ट रोगों के लिए नैदानिक ​​मूल्य

बीमारी

बायोप्सी की नैदानिक ​​भूमिका

यंत्रवत स्पष्टीकरण

प्राथमिक मायलोफाइब्रोसिस (पीएमएफ)

निदान के लिए स्वर्ण मानक

स्मीयर फ़ाइब्रोसिस की डिग्री नहीं दिखा सकते; बायोप्सी पर रेटिकुलिन का धुंधलापन एमएफ ग्रेडिंग की पुष्टि करता है

हेयरी सेल ल्यूकेमिया (HCL)

विशेषता निदान

बायोप्सी से पता चलता है कि "तले हुए अंडे" की बालों वाली कोशिका में घुसपैठ और प्रमुख रेटिकुलिन फाइब्रोसिस है; स्मीयरों में एचसीएल कोशिकाएं छूट सकती हैं

एमडीएस से एएमएल प्रगति

पूर्व चेतावनी

बायोप्सी स्मीयरों पर प्रचुर विस्फोटों से पहले, अपरिपक्व अग्रदूतों (एएलआईपी) के असामान्य स्थानीयकरण के उद्भव और विस्तार को प्रदर्शित कर सकती है।

लिंफोमा मज्जा भागीदारी

घुसपैठ पैटर्न निर्धारण

स्टेजिंग और उपचार निर्णयों के लिए महत्वपूर्ण गांठदार, अंतरालीय, मिश्रित और फैलाना पैटर्न - को अलग करता है

मेटास्टेटिक ट्यूमर

नैदानिक ​​पुष्टि

स्पष्ट रूप से उपकला ट्यूमर घोंसले या मेटास्टैटिक मेलेनोमा दिखाता है; IHC प्राथमिक साइट की पहचान करता है

(5) "ड्राई टैप" का विभेदक निदान - बायोप्सी की अपूरणीय भूमिका

एक "सूखा नल" को इस प्रकार परिभाषित किया गया है: आकांक्षा सुई स्पष्ट रूप से मज्जा गुहा में प्रवेश कर गई है, लेकिन बार-बार प्रयास करने से कोई तरल पदार्थ नहीं निकलता है। बायोप्सी के सामान्य कारण और नैदानिक ​​मूल्य:

सूखे नल का कारण

बायोप्सी निष्कर्ष

नैदानिक ​​महत्व

मायलोफाइब्रोसिस

प्रचुर मात्रा में रेटिकुलिन फाइबर; मज्जा गुहा कोलेजन से भरी हुई

पीएमएफ या सेकेंडरी मायलोफाइब्रोसिस की पुष्टि करता है

व्यापक घातक घुसपैठ

मज्जा गुहा मेटास्टैटिक कार्सिनोमा या मेलेनोमा कोशिकाओं से भरी होती है, जो सामान्य हेमटोपोइजिस को बाहर निकाल देती है

मेटास्टेसिस स्रोत की पहचान करता है (IHC की आवश्यकता है)

अत्यधिक ल्यूकेमिक हाइपरसेल्युलैरिटी

मज्जा गुहा लगभग पूरी तरह से घने ल्यूकेमिक कोशिकाओं से भरी हुई है; अत्यधिक उच्च चिपचिपापन

AML/ALL की पुष्टि करता है (किसी भी प्राप्त स्मीयर के साथ संयुक्त)

मज्जा परिगलन

पूरे ऊतक में अनाकार इओसिनोफिलिक सामग्री और परमाणु मलबा

गंभीर संक्रमण, डीआईसी, या ट्यूमर लसीका का सुझाव देता है

तकनीकी कारक

हिस्टोलॉजिकली सामान्य हेमटोपोइजिस

पैथोलॉजिकल कारणों को छोड़कर; किसी भिन्न स्थल पर आकांक्षा को दोहराएँ


V. तुलना की गई सीमाएँ - गहन विश्लेषण

5.1 अस्थि मज्जा आकांक्षा की सीमाएँ

(1) प्राकृतिक वास्तुकला का विनाश - "सेलुलर सोशल नेटवर्क" का नुकसान

एस्पिरेशन अस्थि मज्जा ऊतक को एकल -कोशिका निलंबन में फैला देती है। हालाँकि यह व्यक्तिगत कोशिका परीक्षण की सुविधा प्रदान करता है, इसका मतलब हैकोशिकाओं के बीच स्थानिक संबंध की जानकारी का पूर्ण नुकसान, शामिल:

यह निर्धारित करने में असमर्थता कि क्या विस्फोट क्लस्टर्ड हैं (ALIP घटना)

रेटिकुलिन फाइबर प्रसार का आकलन करने में असमर्थता

हेमेटोपोएटिक और वसायुक्त क्षेत्रों के बीच सीमाओं को अलग करने में असमर्थता

यह जानकारी बिल्कुल वही है जो एमडीएस और मायलोफाइब्रोसिस के निदान में सबसे महत्वपूर्ण है।

(2) साइनसॉइडल प्रदूषण - "पानी कम होने" का जोखिम

यहां तक ​​कि सबसे अनुभवी हाथों में भी, एस्पिरेट नमूनों में अनिवार्य रूप से साइनसॉइडल रक्त का कुछ अनुपात होता है। अध्ययनों से पता चलता है कि लगभगरूटीन मैरो एस्पिरेट स्मीयर में 10%-30% कोशिकाएं साइनसॉइडल तनुकरण से उत्पन्न होती हैं. यह तनुकरण प्रभाव विशेष रूप से इसमें स्पष्ट होता है:

Over-aspiration (>1 मिली)

अत्यधिक तीव्र आकांक्षा

महत्वपूर्ण हाइपरस्प्लेनिज्म (त्वरित साइनसोइडल प्रवाह) वाले मरीज़

आंतरिक रूप से हाइपोसेल्यूलर मज्जा (कम सामान्य कोशिकाएं, उच्च तनुकरण अनुपात)

परिणाम: ब्लास्ट प्रतिशत को कम करके आंका गया है, संभावित रूप से उच्च जोखिम वाले एमडीएस को निम्न जोखिम के रूप में गलत वर्गीकृत किया गया है, या एएमएल निदान पूरी तरह से गायब है।

(3) ड्राई टैप - परीक्षा विफलता का "मृत अंत"।

जैसा कि ऊपर बताया गया है, जब नल सूखा होता है, तो एस्पिरेशन से कोई वैध नमूना नहीं मिलता है। बाद की बायोप्सी के बिना, रोगी को लंबे समय तक निदान अंतराल और संभावित रूप से दोहराई जाने वाली प्रक्रियाओं के अतिरिक्त दर्द का सामना करना पड़ता है।

5.2 अस्थि मज्जा बायोप्सी की सीमाएँ

(1) कोशिका प्रकार की पहचान में कठिनाई - "भीड़ में चेहरे का अंधापन"

3-5 μm मोटे ऊतक खंडों में, नाभिक लंबवत रूप से ओवरलैप होते हैं और साइटोप्लाज्म संकुचित होता है, जिससे:

मायलोब्लास्ट को मोनोब्लास्ट से अलग करने में कठिनाई (स्मीयरों पर पॉक्स का धुंधलापन इसे हल करता है)

कभी-कभी एरिथ्रोइड अग्रदूतों को लिम्फोसाइटों से अलग करने में असमर्थता

माइक्रोमेगाकार्योसाइट्स की पहचान करने में अत्यधिक कठिनाई

इस प्रकार, जबकि बायोप्सी आपको बता सकती है कि "यहां कई घनी रूप से भरी हुई कोशिकाएं हैं"।आपको सटीक रूप से यह नहीं बताया जा सकता कि वे कोशिकाएँ वास्तव में क्या हैं.

(2) सूक्ष्म अंतःकोशिकीय संरचनाओं का सीमित विज़ुअलाइज़ेशन - "अपर्याप्त पिक्सेल रिज़ॉल्यूशन"

प्रसंस्करण चरण - फिक्सेशन (फॉर्मेलिन), डीकैल्सीफिकेशन (अम्लीय वातावरण), और एम्बेडिंग (गर्म पैराफिन) - कुछ हद तक कोशिका सिकुड़न और विकृति का कारण बनते हैं:

न्यूक्लियोली अस्पष्ट हो सकता है या गायब हो सकता है

साइटोप्लाज्मिक कणिकाएं घुल सकती हैं या अपनी स्थिति बदल सकती हैं

एयूआर छड़ें (एएमएल की विशेषता) को खंडों में पहचानना बेहद मुश्किल है

स्मीयर करने पर, ये बारीक संरचनाएं ताजी स्थिर या निकट जीवित कोशिकाओं में स्पष्ट रूप से दिखाई देती हैं।

(3) साइटोकेमिकल दागों की मात्रा निर्धारित करने में कठिनाई - "गुणात्मक लेकिन मात्रात्मक नहीं"

जैसा कि उल्लेख किया गया है, बायोप्सी अनुभागों में एंजाइम गतिविधि और एंटीजन संरक्षण प्रसंस्करण से प्रभावित होते हैं। साइटोकेमिकल धुंधलापन के परिणाम अधिकतर अर्ध--मात्रात्मक (उदाहरण के लिए, "सकारात्मक" या "कमजोर सकारात्मक") होते हैं, जिनमें स्मीयरों पर प्राप्त होने वाले सटीक प्रतिशत मूल्यों का अभाव होता है। यह तीव्र ल्यूकेमिया के सटीक उपप्रकार में एक स्पष्ट कमी है।


VI. नैदानिक ​​​​निर्णय में पूरक संबंध -दिशानिर्देशों से अभ्यास तक - बनाना

6.1 प्रमुख दिशानिर्देशों की सिफ़ारिशें

दिशानिर्देश स्रोत

सिफारिश

हेमटोलिम्फोइड ट्यूमर का डब्ल्यूएचओ वर्गीकरण (2016/2022)

एमडीएस, एमपीएन, एएमएल आदि के लिए,एक साथ आकांक्षा और बायोप्सी​ अनुशंसित हैं; संयुक्त उपयोग से नैदानिक ​​सटीकता 15%-25% बढ़ जाती है

एनसीसीएन एमडीएस दिशानिर्देश

ब्लास्ट प्रतिशत, फाइब्रोसिस डिग्री और एएलआईपी का आकलन करने के लिए प्रारंभिक एमडीएस निदान के लिए अस्थि मज्जा बायोप्सी अनिवार्य है

अप्लास्टिक एनीमिया पर चीनी विशेषज्ञ की सहमति

अप्लास्टिक एनीमिया के निदान के लिए बायोप्सी आवश्यक है; अकेले स्मीयर स्थानापन्न नहीं हो सकते

ईएलएन एएमएल दिशानिर्देश

एस्पिरेट स्मीयर एएमएल निदान और वर्गीकरण के केंद्र में हैं; बायोप्सी एक पूरक के रूप में कार्य करती है (विशेषकर फाइब्रोसिस, एंजियोजेनेसिस और एमआरडी मूल्यांकन के लिए)

6.2 मानकीकृत "एक पंचर, एक बायोप्सी" रणनीति

प्रमुख अंतरराष्ट्रीय हेमेटोलॉजी केंद्र व्यापक रूप से की रणनीति अपनाते हैंएकल एनेस्थीसिया, एकल पंचर साइट (पोस्टीरियर सुपीरियर इलियाक स्पाइन), बायोप्सी के बाद अनुक्रमिक आकांक्षा:

कदम

आदेश

दलील

स्टेप 1

पहले आकांक्षा पूरी करो

पहले बायोप्सी करने से स्थानीय रक्तस्राव और फाइब्रोसिस हो सकता है, जिससे बाद की आकांक्षा की सफलता कम हो सकती है

चरण दो

दूसरा बायोप्सी करें

आकांक्षा से होने वाले परिवर्तनों का बायोप्सी पर न्यूनतम प्रभाव पड़ता है (जो ऊतक वास्तुकला का मूल्यांकन करता है; मामूली रक्तस्राव समग्र मूल्यांकन को प्रभावित नहीं करता है)

चरण 3

वही पंचर वाली जगह

रोगी की परेशानी कम कर देता है; दोनों नमूने एक ही संरचनात्मक स्थान से आते हैं, सीधे तुलनीय

6.3 रोग-विशिष्ट चयन रणनीति

नैदानिक ​​परिदृश्य

प्राथमिक परीक्षण

माध्यमिक/सहायक

दलील

नव निदान तीव्र ल्यूकेमिया

आकांक्षा धब्बा

बायोप्सी (वैकल्पिक)

एफएबी वर्गीकरण और इम्यूनोफेनोटाइपिंग के लिए पर्याप्त स्मीयर; फाइब्रोसिस/एंजियोजेनेसिस के लिए बायोप्सी

संदिग्ध मायलोफाइब्रोसिस

बायोप्सी

धब्बा (सहायक)

बायोप्सी ही एकमात्र निश्चित निदान पद्धति है

संदिग्ध एमडीएस

दोनों एक साथ

-

WHO के मानदंडों के लिए दोनों की आवश्यकता होती है

अविकासी खून की कमी

बायोप्सी

धब्बा (सहायक)

वसा प्रतिस्थापन मूल्यांकन निदान की कुंजी है

लिंफोमा स्टेजिंग

बायोप्सी

धब्बा (सहायक)

बायोप्सी घुसपैठ पैटर्न दिखाती है; स्मीयर से फोकल भागीदारी छूट सकती है

एकाधिक मायलोमा

दोनों एक साथ

-

प्लाज्मा कोशिका आकृति विज्ञान के लिए स्मीयर; प्लाज्मा सेल क्लस्टरिंग और फाइब्रोसिस के लिए बायोप्सी

मेटास्टेटिक कैंसर वर्कअप

बायोप्सी

धब्बा (सहायक)

बायोप्सी पर IHC प्राथमिक स्थल की पहचान करता है; स्मीयर केवल कभी-कभी ट्यूमर कोशिकाओं को प्रकट करता है

6.4 एक विशिष्ट मामले से अंतर्दृष्टि

मामला: पुरुष, 68 वर्ष, प्रगतिशील थकान और स्प्लेनोमेगाली। सीबीसी: एचबी 82 ग्राम/ली, डब्ल्यूबीसी 4.2×10⁹/ली, पीएलटी 58×10⁹/ली। परिधीय स्मीयर में कभी-कभी अश्रु कोशिकाएँ दिखाई देती हैं।

आकांक्षा अकेली: निश्चित निदान के लिए अपर्याप्त "कुछ असामान्य कोशिकाओं के साथ हाइपोसेल्यूलरिटी" - दर्शाने वाला थोड़ा पतला नमूना प्राप्त हो सकता है; इसका गलत निदान "हाइपोसेल्यूलर एमडीएस" के रूप में किया जा सकता है।

अकेले बायोप्सी: पीएमएफ का सुझाव देते हुए चिह्नित फाइब्रोसिस और क्लस्टर्ड ब्लास्ट दिखाएगा, लेकिन सटीक ब्लास्ट वर्गीकरण असंभव होगा।

संयुक्त: स्मीयर अपरिपक्व माइलॉयड कोशिकाओं के साथ बाईं ओर स्थानांतरित ग्रैनुलोपोइज़िस दिखाता है; बायोप्सी से पता चलता है एमएफ -2 फ़ाइब्रोसिस, सकारात्मक एएलआईपी, और असामान्य मेगाकार्योसाइट आकृति विज्ञान - व्यापक निदान:एमडीएस सुविधाओं के साथ प्राथमिक मायलोफाइब्रोसिस (प्रीफाइब्रोटिक/प्रारंभिक चरण)।, बाद के उपचार के लिए एक सटीक आधार प्रदान करना।

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